化学发光产品及标记物
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[2012-03-19]
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当底物发生化学反应而产生的能量以光的形式释放出来的时候,
我们称这个过程为化学
发光。鲁米诺(
luminol
)是最常用的化学发光试剂之一,被过氧化物氧化后它会产生一种
激发态的产物
--aminophthalate
。这种产物衰变至低能态的同时释放出光子。专利添加物
可以提高鲁米诺反应的发光强度和持续时间(稳定性),从而使增强型化学发光(
ECL
)成
为可能。
化学发光成为大多数蛋白实验室首选的检测方法,其这些优点如下:
1
、使用化学发光
可以通过多次曝光获得最好的成像结果;
2
、可以将检测试剂完全去除,再对其他目的蛋白
进行检测并成像,或对检测条件进行优化;
3
、具有很宽的线性响应范围,从而可以检测并
定量很宽浓度范围的蛋白质;
4
、化学发光在所有的检测方法中具有最高的灵敏度。
在化学发光分析中,
如果再加入适当的增强剂,则灵敏度提高且发光时间延长,
可改善
测定的重现性。
实验证明,
对位酚类衍生物的发光增强作用明显,
其发光效率可上升几十倍,
发光时间也获得有效延长。
吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物应用于化学发光免疫分析(
CLIA
),通常采用的体系是
Acridinium
ester/
H
2
O
2
系统。
即用吖啶酯或吖啶磺酰胺标记抗体或抗原,
用
HNO
3
+H
2
O
2
和
NaOH
作发光启动试剂。有些在发光启动试剂中加入
Triton
X-100
,
CTAC
,
Twee
n-20
等表面活性剂以增强发光。
自然中广泛分布着生物发光有机体,其中包括细菌、真菌、鱼、昆虫等。在这些生物发
光有机体中催化生物发光反应的各种酶都称之为荧光素酶(
Luciferases
),底物则命名为
荧光素(
Luciferin
)。
D-
荧光素(
D-luciferin)
是生物冷光检查使用最广泛的物质,是荧
光素检测试剂盒的核心成份,广泛应用于生物、医药、食品、卫生、环境等领域。
D-
荧光
素、
D-
荧光素钾盐、
D-
荧光素钠盐,作为
Luciferase
的作用底物,常用于以下实验:
1
.报告基因分析
2
.动物活体成像
(In
vivo
imaging)
和细胞体外分析(
In
vitro
imaging
)