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D-荧光素使用中的常见问题


D-

荧光素适合做哪些实验

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D-

荧光素钾盐和

5-

-

荧光素,

作为

Luciferase

的作用底物,常用于以下实验:

 

1.

 

报告基因分析

 

2.

 

In vivo imaging (

动物活体成像

3.

 

In vitro imaging (

细胞体外分析

4.

 

ATP

测定

 

5.

 

其它

luciferase

及其基因相关的分析和研

究工作

 

 

D-

荧光素钾盐溶液的稳定性

 

 

D-

荧光素钾盐易溶于水和缓冲液,溶解度可

高达

25mg/mL

一般使用浓度为

3-15 mg/mL

 

溶液的

pH

值、

溶液中的氧气和保存时间对其

保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的

pH<6.5

(发生水解作用)或

>7.5

(发生消旋化

作用,

D

型转化为

L

型)的情况下,

D-

荧光

素钾盐相对不稳定。如果溶液中存在少量的

氧气,将加速

D-

荧光素钾的降解速度。

 

D-

荧光素配成溶液后,在最佳的保存条件

-80°C

,最佳

pH

,无氧气)下,存在固定的

降解速度:

0.2%/

天,因此配成溶液保存的

D-

荧光素应尽量在

1

年内使用完。

 

有水存在的情况下,主要发生消旋化作用,

D-

荧光素转化成

L-

荧光素,有报道称

L-

荧光素对荧光素酶催化的酶促反应有抑制作

用。

D-荧光素适合做哪些实验?  

D-荧光素钾盐和5-氟-荧光素,作为Luciferase的作用底物,常用于以下实验: 1. 报告基因分析 

2. In vivo imaging (动物活体成像) 3. In vitro imaging (细胞体外分析) 4. ATP测定 

5. 其它luciferase及其基因相关的分析和研

究工作  D-荧光素钾盐溶液的稳定性  

D-荧光素钾盐易溶于水和缓冲液,溶解度可高达25mg/mL。一般使用浓度为3-15 mg/mL。 溶液的pH值、溶液中的氧气和保存时间对其保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的pH<6.5(发生水解作用)或>7.5(发生消旋化作用,D型转化为L型)的情况下,D-荧光素钾盐相对不稳定。如果溶液中存在少量的氧气,将加速D-荧光素钾的降解速度。 D-荧光素配成溶液后,在最佳的保存条件(-80°C,最佳pH,无氧气)下,存在固定的降解速度:0.2%/天,因此配成溶液保存的D-荧光素应尽量在1年内使用完。 

有水存在的情况下,主要发生消旋化作用,即D-荧光素转化成L-荧光素,有报道称L-荧光素对荧光素酶催化的酶促反应有抑制作用。


D-荧光素、D-荧光素钠和D-荧光素钾之间的区别  

主要区别在于溶解和分散性能。D-荧光素钾盐在水和缓冲液中的溶解度高,且溶解速度较快,故在一般的生物学试验中常用D-荧光素钾盐。 

D-荧光素钾的保存和运输条件  

保存条件:≤-20°C,避光,保持干燥。(在不打开包装的条件下,可保存两年时间)。 运输条件:高纯度的D-荧光素钾可在短时间内常温条件下保存,运输条件为常温。 原装(没有打开包装)荧光素的包装瓶中充有氩气,保证其稳定性,打开包装后,请严格按照保存条件保存。 



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