D-
荧光素适合做哪些实验
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D-
荧光素钾盐和
5-
氟
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荧光素,
作为
Luciferase
的作用底物,常用于以下实验:
1.
报告基因分析
2.
In vivo imaging (
动物活体成像
)
3.
In vitro imaging (
细胞体外分析
)
4.
ATP
测定
5.
其它
luciferase
及其基因相关的分析和研
究工作
D-
荧光素钾盐溶液的稳定性
D-
荧光素钾盐易溶于水和缓冲液,溶解度可
高达
25mg/mL
。
一般使用浓度为
3-15 mg/mL
。
溶液的
pH
值、
溶液中的氧气和保存时间对其
保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的
pH<6.5
(发生水解作用)或
>7.5
(发生消旋化
作用,
D
型转化为
L
型)的情况下,
D-
荧光
素钾盐相对不稳定。如果溶液中存在少量的
氧气,将加速
D-
荧光素钾的降解速度。
D-
荧光素配成溶液后,在最佳的保存条件
(
-80°C
,最佳
pH
,无氧气)下,存在固定的
降解速度:
0.2%/
天,因此配成溶液保存的
D-
荧光素应尽量在
1
年内使用完。
有水存在的情况下,主要发生消旋化作用,
即
D-
荧光素转化成
L-
荧光素,有报道称
L-
荧光素对荧光素酶催化的酶促反应有抑制作
用。
D-荧光素适合做哪些实验?
D-荧光素钾盐和5-氟-荧光素,作为Luciferase的作用底物,常用于以下实验: 1. 报告基因分析
2. In vivo imaging (动物活体成像) 3. In vitro imaging (细胞体外分析) 4. ATP测定
5. 其它luciferase及其基因相关的分析和研
究工作 D-荧光素钾盐溶液的稳定性
D-荧光素钾盐易溶于水和缓冲液,溶解度可高达25mg/mL。一般使用浓度为3-15 mg/mL。 溶液的pH值、溶液中的氧气和保存时间对其保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的pH<6.5(发生水解作用)或>7.5(发生消旋化作用,D型转化为L型)的情况下,D-荧光素钾盐相对不稳定。如果溶液中存在少量的氧气,将加速D-荧光素钾的降解速度。 D-荧光素配成溶液后,在最佳的保存条件(-80°C,最佳pH,无氧气)下,存在固定的降解速度:0.2%/天,因此配成溶液保存的D-荧光素应尽量在1年内使用完。
有水存在的情况下,主要发生消旋化作用,即D-荧光素转化成L-荧光素,有报道称L-荧光素对荧光素酶催化的酶促反应有抑制作用。
D-荧光素、D-荧光素钠和D-荧光素钾之间的区别
主要区别在于溶解和分散性能。D-荧光素钾盐在水和缓冲液中的溶解度高,且溶解速度较快,故在一般的生物学试验中常用D-荧光素钾盐。
D-荧光素钾的保存和运输条件
保存条件:≤-20°C,避光,保持干燥。(在不打开包装的条件下,可保存两年时间)。 运输条件:高纯度的D-荧光素钾可在短时间内常温条件下保存,运输条件为常温。 原装(没有打开包装)荧光素的包装瓶中充有氩气,保证其稳定性,打开包装后,请严格按照保存条件保存。