D-Luciferin:有三种,分别是D-Luciferin, Sodium Salt/D荧光素钠盐、D-Luciferin, Potassium Salt/D-荧光素钾盐和D-Luciferin Firefly,free acid/D-萤火虫荧光素
YEASEN公司提供几种常用类型的D-Luciferin,每批试剂都经过严格的质量验证(经9次独立的HPLC和FTIR标准法监测)和发光效率检测,确保客户每次试验的高重复性和成功性。所有产品都可用于体内成像分析和体外化学发光检测实验。YEASEN的D-Luciferin是合成的萤火虫荧光素,结构与promega公司提供的甲虫荧光素一致,是水溶性的萤火虫荧光素酶底物。
(1)D-Luciferin, Sodium Salt/D荧光素钠盐
分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O 分子量:320.32 g/mol 纯度:高级纯(99.7%)
应 用:1)体外化学发光分析(in vitro);2)活体成像实验(in vivo);3)高灵敏度ATP分析;
步 骤:
Protocol 1:In Vitro Bioluminescent Assays/ 体外生物发光检测
1)用33.3 mL蒸馏水溶解1.0 gD-荧光素钠盐,配制成100 mM的储存液(200×,浓度30mg/ml)。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。
2)用组织培养基1∶200稀释储存液,配置工作液(终浓度150μg/mL)。
3)去除培养细胞的培养基。
4)待图像分析前,向细胞内添加1×荧光素工作液,然后进行图像分析。
Protocol 2:In vivo analysis / 活体成像分析
1)用无菌的PBS(w/o Mg2+、Ca2+)配制D-荧光素钠盐工作液(15mg/mL),0.2um滤膜过滤除菌。一旦使用,保持冰冷且避光。
2)注射量取决于注射方式,具体如下:
注射方式 | 剂量 |
静脉注射(25-27 gauge针头) | 按10 uL/g体重浓度,加入相应体积的15 mg/mL荧光素工作液 |
腹腔注射(25-27 gauge针头) | 按10 uL/g体重浓度,加入相应体积的15 mg/mL荧光素工作液 |
肌肉注射(27 gauge针头) | 50 uL,浓度为1–2 mg/mL荧光素工作液 |
鼻内注射(pipette) | 50 uL,浓度为3 mg/mL荧光素工作液 |
3)注射入体内5-10分钟后,进行成像分析。
(2)D-Luciferin, Potassium Salt/D-荧光素钾盐;
分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O 分子量:320.32 g/mol 纯度:高级纯(99.7%)
应用:1)活细胞、组织或生物体内luc标记基因和荧光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析;
2)广泛用于报告基因分析,免疫分析和ATP荧光卫生监测分析;
Protocol 1:In Vitro Bioluminescent Assays/ 体外生物发光检测
1)配制成100 mM的储存液(200×,浓度30mg/ml)。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。
2)用预热好的组织培养基1∶200稀释储存液,配制工作液(终浓度150μg/mL)。
3)去除培养细胞的培养基直至无残留。
4)图像分析前立即向细胞内添加1×荧光素工作液,然后进行图像分析(或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号)。
Protocol 2:In vivo analysis in mice / 小鼠活体成像分析
1)用无菌的DPBS(w/o Mg2+、Ca2+)配制D-荧光素钾盐溶液(15mg/mL),0.2um滤膜过滤除菌。一旦使用,保持冰冷且避光。
2)按10 μL/g体重的浓度向每支小鼠注射相应量的15mg/mL荧光素溶液;
3)腹腔注射10-15 min后进行成像分析。(对每只动物模型做荧光素动力学研究以确定峰值信号获取时间)
(3)D-Luciferin Firefly,free acid/D-萤火虫荧光素
分子式:C11H8N2O3S2 分子量:280.330 g/mol 外观:白色至浅黄色粉末
溶解:0.25%浓度溶解于甲醇,形成近乎无色至浅黄色的清夜
保存:-15°C 避光
应用:1)活细胞、组织或生物体内luc标记基因和荧光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析;
2)广泛用于报告基因分析,免疫分析和ATP荧光卫生监测分析;