尿素检测方法建立及方法学考察
王立英,吴丽艳，刘雨萌,左一涵，方森海,高波
摘要[目的]通过紫外分光光度法建立氮肥中尿素含量的测定方法。[方法]利用紫外分光光度计,根据Ehrlich反应，二甲氨基苯甲酸可以与含氮的有机化学物发生显色反应,此物质在403nm处有最大吸收峰,颜色的深成与测定的展素含量呈正比，因此通过测定反应液在403 nm处的吸光值来确定尿素溶液中尿素含量。[结果]得到尿素检测标准曲线为y =0.004 3x+0.009 9(R2 =0.999 2),尿素浓度在3.75~210 ug/ml之间呈良好线性关系，平均回收率为96.83% ， RSD=0.2%。[结论]该方法准确度、精密度良好,可以用来测定尿素的含量。
关键词紫外分光光法；检测方法;方法学；尿素
中图分类号S188 文献标识码A 文章编号0517 - 6611(2013)12 - 05173 - 03
目前,尿素在农药、饲料中的使用巳经越来越普遍,而尿素的检测方法有多种，常用的有酶反应速率法、酶解-波氏比色法、萘氏比色法、格里斯试剂法、二乙酰乙两法[3]等。但尿素本身存在不稳定性，在一定程度上增加了检测的难度。目前各地应用的检测方法各异，相互间的检测效果也没有可比性。该研究通过二甲氨基苯甲酸（DMAB)原理是利用对二甲氨基苯甲醛为显色剂，在强酸作用下与尿素发生显色反应。利用DMAB法测定尿素含量,发现数据的线性关系良好,重复性和稳定性良好，显色反应之后1 d之内不退色。操作流程简便，无需加热。
就目前我国质量技术监管体质不完善的情况，修改和加强各项更为有效的检测方法是非常必要的。尿素含量检测方法的研究有助于更好地实现含尿素产品的专属性检测，以提高其检测效率和准确性,丰富尿素含量检测的方法与方案。笔者主要采用二甲胺基苯甲醛法（DMAB)测定尿素含量以及方法学考察,总结出最准确、稳定、简便、适用性最广的检测方案，为尿素含量的检测提供相关的参考指标。
1材料与方法
1.1试验仪器及试剂
1.1.1主要试验仪器。电子分析天平（HZK-210,深圳市威尔创恒科技有限公司）；紫外可见分光光度计(752-P,上海精科仪器有限公司）；光照培养箱(SPX-300IC，上海一恒科学仪器有限公司）；数显鼓风干燥箱（DHG-9140A,上海一恒科学仪器有限公司）；药品稳定性实验箱（LHH-150SD，上海一恒科学仪器有限公司）。
1.1.2主要试验试剂。对二甲氨基苯甲酸（C9H11NO，AR，阿拉丁试剂）；乙醇（C2O5OH,AR，阿拉丁试剂）；浓盐酸(HC1，AR，阿拉丁试剂）；尿素标准品（CON2H4,标准品GBW09201，中国计量科学研究院）；脲（CON2H4,阿拉丁试剂）。
1.2方法
1.2.1溶液的配制。
1.2.1.1 DMAB显色溶液。准确称取2. 0000 g DMAB,转移至100ml容量瓶中，加人30 ~ 50ml浓度95%乙醇溶液，混合均勾，加人浓盐酸(浓度36% ) 6.00ml,至DMAB溶解完全后,使用浓度95%乙醇定容至100ml,备用。
1.2.1.2尿素标准溶液。精密称取尿素标准品0.3750 g，用少量去离子水溶解后转移至100ml容量瓶中，定容，混勾，配制成浓度为3 750 ug/ml标准储备液①。从该标准储备液中取出10ml溶液于100ml容量瓶中，定容，摇勾，得浓度为375ug/ml标准储备液②，备用。
1.2.2尿素标准曲线的建立。依次从标准储备液②中精密量取溶液，以去离子水作为空白对照,各加入DMAB 10ml，然后使用去离子水定容至25ml。采用紫外分光光度计在406 nm处测定吸光度(A406),以浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，建立标准曲线。
